SIRT1調(diào)控凋亡對人退變終板軟骨細(xì)胞的影響.pdf

1、目的：探討人退變終板軟骨(cartilage endplate，CEP)中凋亡和沉默信息調(diào)節(jié)因子2同源物1（ silent information regulation2 homolog-1，SIRT1）的表達(dá)情況，探討 SIRT1是否可以抑制退變 CEP細(xì)胞的凋亡。
　　方法： CEP取材于重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院腰椎間盤突出（ lumbar disc herniation，LDH）和腰椎骨折(lumbar vertebrae

2、fracture, LVF)的手術(shù)患者(時間從2014年6月到2015年5月），用Pfirrmann分級評價人椎間盤退變程度。HE染色觀察正常和退變CEP的細(xì)胞形態(tài)和細(xì)胞數(shù)量，免疫組織化學(xué)觀察正常和退變CEP中SIRT1，caspase3，Ⅱ型膠原的表達(dá)。單層培養(yǎng)CEP細(xì)胞，取p2代CEP細(xì)胞完成實驗。細(xì)胞經(jīng)過白藜蘆醇和 SIRT1干擾 RNA或尼克酰胺處理后，westernblot檢測SIRT1、Bcl-2和caspase3的表達(dá)，流

3、式細(xì)胞學(xué)檢測細(xì)胞凋亡率。
　　結(jié)果：HE染色結(jié)果表明終板組織細(xì)胞為類圓形軟骨細(xì)胞類型，退變CEP細(xì)胞數(shù)量減少。免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示，退變CEP中SIRT1和Ⅱ型膠原的表達(dá)下降，凋亡相關(guān)因子 caspase-3的表達(dá)上升。白藜蘆醇處理CEP細(xì)胞后SIRT1和Bcl2的表達(dá)上升，凋亡相關(guān)蛋白caspase-3的蛋白表達(dá)下降，細(xì)胞凋亡率下降；經(jīng)SIRT1干擾RNA或尼克酰胺處理后SIRT1和Bcl2的表達(dá)下降，caspase3表達(dá)上升，