脂肝方對非酒精性脂肪肝NF-κB-TNF-α-Bcl-2通路的調節(jié)效應.pdf

1、目的：本課題針對“NF-κB-T NF-α”/Bc l-2信號通路在非酒精性脂肪肝病發(fā)病中的作用，通過實驗研究觀察脂肝方對非酒精性脂肪肝病大鼠肝細胞炎癥、凋亡，及其相關的NF-κB、TNF-α、bc l-2蛋白的表達影響，旨在探討脂肝方對非酒精性脂肪肝病“NF-κB-TNF-α”/Bc l-2信號通路介導的肝細胞炎癥與凋亡的干預效應。
　　方法：SD大鼠80只大鼠適應性喂養(yǎng)1周后，隨機分出10只作為8周空白組（第8周末處死）和10

2、只12w空白組為正常對照組，始終喂養(yǎng)普通飼料。其余60只高脂飼料喂養(yǎng)至8周后，隨機分出8周模型組10只（第8周末處死）、其余50只繼續(xù)高脂飼料喂養(yǎng)，隨機分為12周模型組、脂肝方低劑量組、脂肝方中劑量組、脂肝方高劑量組及西藥組各10只，五組喂養(yǎng)高脂飼料至實驗結束。第8周至第12周之間進行藥物干預，中藥組大鼠給予脂肝方高、中、低劑量灌胃，西藥組大鼠予立普妥灌胃，連續(xù)4周。各組動物喂養(yǎng)至12周末處死取材。禁食12小時后取血，采集肝臟，采用全自

3、動生物化學儀檢測血清ALT、AS T、TG、TC的水平；HE染色觀察各組肝組織病理學改變；WesternBlot檢測NF-κB、TNF-α及bcl-2蛋白表達水平。
　　結果：實驗結果表明，模型組血清ALT、AS T、TG、TC較同期空白組顯著升高（P＜0.01），12周模型組炎癥細胞浸潤、壞死程度及肝細胞脂肪變性程度，明顯比8周模型組嚴重（P＜0.05）。與模型組相比，病理學顯示治療組的脂肪性炎性及脂質沉積有明顯減輕和好轉，使實

4、驗大鼠肝組織病理學改變減輕并且趨于正常，治療組血清TC、TG的含量明顯降低，肝功能ALT和AST明顯下降。治療組降低大鼠血清ALT、AST、TG、TC的作用，其中脂肝方高劑量組療效最為顯著。Western Blot結果顯示，模型組NF-κB蛋白表達水平較同期空白組明顯升高，而bcl-2蛋白表達則比同期空白組顯著降低（P＜0.05）。與同期模型組比較，治療組大鼠的肝組織NF-κB蛋白表達顯著降低（P＜0.01），bcl-2蛋白表達明顯上升

5、（P＜0.01），脂肝方高劑量組明顯優(yōu)于其他各治療組。與空白組相比，同期模型組肝臟組織TNF-α表達顯著上升（P<0.01），藥物干預后各組TNF-?表達均不同程度降低，高劑量組明顯優(yōu)于其它治療組（P＜0.01）。
　　結論：脂肝方具有肝臟保護作用，明顯改善非酒精性脂肪性肝病模型大鼠的肝臟脂肪變性、調節(jié)脂質代謝和抑制細胞脂滴聚集。脂肝方通過降低NF-κB和TNF-α的表達水平來減輕炎癥反應，通過上調抗凋亡因子bcl-2蛋白表達水平