歸芪益元膏對重離子輻射肺損傷大鼠DNA雙鏈斷裂及旁效應的影響.pdf

1、目的：通過觀察歸芪益元膏對重離子輻射肺臟的肺腎旁效應模型大鼠DNA雙鏈斷裂和修復因子γH2AX、53BP1表達的影響，分析歸芪益元膏對重離子輻射肺腎旁效應模型大鼠 DNA損傷和修復的調控機理，從DNA損傷和修復的層面探討其對輻射旁效應防護的分子生物學機制，為臨床使用歸芪益元膏防護輻射旁效應損傷提供理論基礎和藥效學基礎。
　　方法：將42只SPF級Wistar雄性大鼠隨機分為3組，分別為空白組、輻射組、中藥組，其中空白組6只，輻射組

2、和中藥組各18只。對中藥組大鼠進行歸芪益元膏湯劑灌胃處理，灌胃劑量為2mL/天，時間為14天；其他組同步給予生理鹽水灌胃處理。藥物干預結束后，對輻射組和中藥組大鼠右肺進行重離子輻射。輻射組和中藥組大鼠分別在輻射后6h、12h、24h各處死6只，采集標本，流式細胞術檢測股骨骨髓細胞周期，Q-PCR法檢測大鼠右肺、左肺、左腎組織中H2AX、53BP1的轉錄水平，Western-blot法檢測大鼠右肺、左肺、左腎組織中γH2AX、53BP1的

3、表達。
　　結果：
　　1.骨髓細胞周期變化：①與空白組相比，輻射組大鼠股骨骨髓細胞中的G0/G1期細胞率在重離子輻射后12h下調，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。與空白組相比，中藥組大鼠股骨骨髓細胞中G0/G1期細胞率在重離子輻射后12h、24h下調，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。②與空白組相比，輻射組大鼠股骨骨髓細胞中的S期細胞率在重離子輻射后12h升高，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。與空白組相比，中藥組大鼠股

4、骨骨髓細胞中的S期細胞率在重離子輻射后6h升高，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），在重離子輻射后12h、24h明顯升高，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。③與空白組相比，輻射組大鼠股骨骨髓細胞中的G2/M期細胞率在重離子輻射后6h無明顯差異（P＞0.05），在重離子輻射后12h、24h均明顯升高，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。與空白組相比，中藥組大鼠股骨骨髓細胞中的G2/M期細胞率在重離子輻射后6h無明顯差異（P＞0.05），在重離

5、子輻射后24h明顯升高，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。
　　2.右肺、左肺、左腎組織中H2AXmRNA表達變化：①與空白組相比，輻射組大鼠右肺中 H2AXmRNA在重離子輻射后6h、12h、24h明顯升高，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。與同時間點輻射組相比，中藥組大鼠右肺中 H2AXmRNA在重離子輻射后6h、12h、24h明顯降低，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。②與空白組相比，輻射組大鼠左肺、左腎中H2AXmRNA在

6、重離子輻射后6h、12h、24h明顯升高，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。與同時間點輻射組相比，中藥組大鼠左肺、左腎中H2AXmRNA在重離子輻射后12h、24h明顯降低，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。
　　3.右肺、左肺、左腎組織中53BP1mRNA表達變化：①與空白組相比，輻射組大鼠右肺中53BP1mRNA在重離子輻射后6h、12h、24h明顯升高，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；與同時間點輻射組相比，中藥組大鼠右肺中

7、53BP1mRNA在重離子輻射后6h、12h、24h明顯降低，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。②與空白組相比，輻射組大鼠左肺、左腎中53BP1mRNA在重離子輻射后6h、12h、24h明顯升高，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；與同時間點輻射組相比，中藥組大鼠左肺、左腎中53BP1mRNA在重離子輻射后12h、24h明顯降低，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。
　　4.右肺、左肺、左腎組織中γH2AX蛋白表達變化：①與空白組相比

8、，輻射組大鼠右肺中γH2AX蛋白在重離子輻射后6h、12h、24h明顯升高，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。與同時間點輻射組相比，中藥組大鼠右肺中γH2AX蛋白在重離子輻射后6h、12h、24h明顯降低，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。②與空白組相比，輻射組大鼠左肺、左腎中γH2AX蛋白在重離子輻射后6h、12h、24h明顯升高，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。與同時間點輻射組相比，中藥組大鼠左肺、左腎中γH2AX蛋白在重離子輻射

9、后6h、12h、24h明顯降低，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。
　　5.右肺、左肺、左腎組織中53BP1蛋白表達變化：①與空白組相比，輻射組大鼠右肺中53BP1蛋白在重離子輻射后6h、12h、24h明顯升高，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。與同時間點輻射組相比，中藥組大鼠右肺中53BP1蛋白在重離子輻射后6h、12h、24h明顯降低，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。②與空白組相比，輻射組大鼠左肺、左腎中53BP1蛋白在重離

10、子輻射后6h、12h、24h明顯升高，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。與同時間點輻射組相比，中藥組大鼠左肺、左腎中53BP1蛋白在重離子輻射后12h、24h明顯降低，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。
　　結論：歸芪益元膏通過調控直接輻射組織右肺、輻射旁組織左肺和輻射旁器官左腎中γH2AX、53BP1的表達，可有效預防由重離子輻射引起的靶組織、旁組織和旁器官細胞中的DNA雙鏈斷裂，同時可促進DNA的修復。這可能是歸芪益元膏防護重