火麻仁木脂素酰胺的抗神經炎癥活性研究.pdf

1、目前，神經退行性疾病（阿爾茨海默病，帕金森病和多發(fā)性硬化等）的發(fā)病率越來越高并趨于低齡化。這些疾病的發(fā)生、發(fā)展與氧化損傷、免疫炎癥、線粒體功能性障礙、興奮性毒素和細胞凋亡等機制有關。研究發(fā)現(xiàn)在神經退行性疾病的發(fā)生、發(fā)展過程中，小膠質細胞介導的炎癥相關反應起著非常重要作用。細胞性毒素、化學、物理刺激等均會激活小膠質細胞，并釋放大量的炎癥因子，加劇炎癥反應。小膠質細胞誘導神經炎癥的發(fā)生并活化很多相關信號通路，比如:Toll樣受體，JAK/S

2、TAT，NF-κB和MAPK等。其中NF-κB是介導炎癥發(fā)生的重要信號通路，NF-κB的激活會誘導產生大量的炎癥細胞因子，炎癥因子反過來刺激細胞，使細胞發(fā)生持續(xù)的激活，進而控制大量細胞因子的基因表達。在小膠質細胞激活過程中，NF-κB會與其他炎癥相關通路共同作用，調節(jié)炎癥反應。所以，發(fā)現(xiàn)有效的控制NF-κB信號通路活化的化合物將有望成為神經退行性相關疾病治療的潛在方法。
　　火麻仁提取物在神經保護方面具有較好的活性，本課題組前期對

3、火麻仁進行了化學成分研究，獲得了一系列木脂素酰胺類化合物。本論文通過建立脂多糖(LPS)刺激BV2小膠質細胞的神經炎癥模型，對這些化合物進行了抗炎活性篩選，并對篩選出的活性化合物grossamide、cannabisin F是否抑制LPS引起的NF-κB信號通路的激活進行研究，以發(fā)現(xiàn)其通過NF-κB信號通路干預來治療神經炎癥相關疾病的潛力。
　　研究結果表明grossamide表現(xiàn)出潛在的抗炎活性。ELISA及qRT-PCR結果顯

4、示grossamide可以抑制LPS誘導的BV2細胞的炎癥因子IL-6和TNF-α的表達。Western blot和免疫熒光等檢測結果顯示grossamide可以抑制IκBα及NF-κBp65蛋白的磷酸化，阻止NF-κ Bp65表達入核，同時阻止了NF-κB上游蛋白TLR4及MyD88的表達。說明grossamide可以通過抑制TLR4介導的NF-κB的信號通路起到保護小膠質細胞的作用。
　　研究結果表明cannabisin F同

5、樣表現(xiàn)出抗炎能力。細胞內活性氧檢測結果顯示cannabisin F可以抑制BV2細胞產生ROS。Western blot結果顯示cannabisinF可以促進SIRT1，Nrf-2及下游蛋白HO-1的表達，同時可以抑制IκBα及NF-κBp65蛋白的磷酸化表達。ELISA及RT-PCR的結果顯示cannabisin F可以抑制LPS刺激BV2細胞產生的炎癥因子IL-6和TNF-α的表達。說明cannabisin F可通過激活SIRT1/