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文檔簡介
1、目的:
本實驗采用因正畸需要拔除的新鮮人單根管前磨牙標本建立白色念珠菌感染模型。選用桂皮醛、1mg/ml丹皮酚溶液為根管消毒試驗藥物,并以根管內(nèi)消毒藥物甲醛甲酚作為對照,觀察兩種中藥對根管內(nèi)白色念珠菌的抑菌效果,以期為治療失敗的感染根管尋找安全、有效的治療藥物。
方法:
1、白色念珠菌感染根管模型的建立
收集60顆因正畸需要新鮮拔除的人單根管前磨牙,隨機分為5組,1組為空白對照組,1組為實驗對照組
2、,3組為實驗組,每組12顆。在牙頸部距根尖12mm處切除離體牙牙冠部分,保留牙根。進行常規(guī)拔髓及根管預備。根管預備采用機動(登士柏機用根管馬達)(08錐度)Protaper器械進行,先用SX敞開根管口,然后按照S1、S2、F1、F2的順序進行根管預備到25號,過程中每更換一次器械,即用分別裝有MTAD和2.5%次氯酸鈉溶液的注射器安裝23號側向開口針頭交替提拉沖洗根管,預備完成后另以注射器裝生理鹽水,大劑量快速在根管內(nèi)沖洗。然后,全部離
3、體牙用超聲蕩洗,干燥。用3M P60復合樹脂封閉根尖孔及根尖孔上2mm部分。
將5組制備好的離體牙放入裝有沙氏液體培養(yǎng)基的容器中,121℃高溫高壓下抑菌20min,靜置在5%CO2電熱恒溫培養(yǎng)箱(37℃)內(nèi),如培養(yǎng)液在24h后無混濁,即認定抑菌完全。
復蘇并鑒定白色念珠菌,將復蘇的白色念珠菌標準菌株用比濁儀將其調整成濁度為0.5M的標準菌液。3組實驗組和1組實驗對照組離體牙標本培養(yǎng)液中分別放入白色念珠菌菌懸液0.1m
4、l,靜置在5%CO2電熱恒溫培養(yǎng)箱(37℃)內(nèi),7d后取出離體牙標本,鑒定真菌種類,確定無雜菌生長。成功建立白色念珠菌根管感染模型。
2、不同藥物干預白色念珠菌感染根管模型
3、組實驗組分別以無菌棉捻沾取桂皮醛、1mg/ml丹皮酚溶液、甲醛甲酚(約0.2ul)放入根管內(nèi)以Caxiton暫封;實驗對照組及空白對照組封入生理鹽水無菌棉捻。用石蠟將封好的標本根尖向下固定于細菌培養(yǎng)皿中,靜置在37℃電熱恒溫培養(yǎng)箱內(nèi),分別于封
5、藥3d和封藥7d,每組取出6顆標本,去除暫封取出根管內(nèi)藥捻,蒸餾水沖洗根管內(nèi)殘存藥物后干燥根管。無菌條件下,用25號H銼均勻磨取根管內(nèi)層牙本質粉末,進行取樣和菌落培養(yǎng)計數(shù),做統(tǒng)計學分析。同時,進行快速革蘭氏染色,生物顯微鏡下鑒定沙氏液體培養(yǎng)液試管內(nèi)的細菌種類,確定無雜菌生長。
結果:
1、封藥前細菌培養(yǎng)計數(shù)結果顯示,空白對照組無真菌菌落生長,其他各組根管內(nèi)真菌數(shù)量無差異(P>0.05)。
2、封藥3d,桂皮
6、醛組、甲醛甲酚組根管內(nèi)真菌數(shù)量較陽性對照組明顯減少(P<0.05),且桂皮醛組少于甲醛甲酚組(P<0.05)(Fig.6,F(xiàn)ig.8)。1mg/ml丹皮酚溶液組與陽性對照組比較無明顯差異(P>0.05)(Fig.5,F(xiàn)ig.7)。
3、封藥7d,桂皮醛組、甲醛甲酚組根管內(nèi)無真菌生長(P<0.05)(Fig.10,F(xiàn)ig.12)。1mg/ml丹皮酚溶液組真菌數(shù)量較陽性對照組明顯減少(P<0.05)(Fig.9, Fig.11)。
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