職業(yè)性鉻暴露與外周血P16基因甲基化關聯(lián)性研究.pdf

1、目的：
　　本研究通過調(diào)查不銹鋼冶煉工人的職業(yè)史、檢測作業(yè)環(huán)境鉻的外暴露濃度、作業(yè)工人血鉻內(nèi)暴露濃度、外周血P16基因甲基化狀態(tài)及氧化應激指標，探討職業(yè)性鉻暴露對作業(yè)工人外周血P16基因甲基化狀態(tài)及P16基因下游蛋白表達水平的影響，分析氧化應激與P16基因甲基化間關系，為鉻的毒性機制研究提供依據(jù)；探討職業(yè)性鉻暴露工人外周血P16基因甲基化的影響因素，為職業(yè)防護和健康管理提供理論依據(jù)。
　　方法：
　　本研究選擇某鋼鐵集

2、團公司男性不銹鋼冶煉工人216人為鉻暴露組，其中爐前工67人、連鑄工97人以及澆鋼工52人，對應工作環(huán)境分別為煉鋼車間、連鑄車間及澆鋼車間；選擇男性鍋爐運行工121人為對照組，對應工作環(huán)境為鍋爐運行車間。研究對象近期3個月無抗腫瘤藥物服用史、電離輻射接觸史。參照《工作場所空氣中有害物質監(jiān)測的采樣規(guī)范》（GBZ159-2004）及《工作場所空氣有毒物質測定》（GBZ/T160-2004）對作業(yè)工人作業(yè)場所監(jiān)測采樣；采用統(tǒng)一設計的調(diào)查問卷對

3、研究對象進行流行病學調(diào)查；抽取工人班后空腹3ml抗凝靜脈血與3ml非抗凝靜脈血。采用石墨爐原子吸收光譜法（Graphite furnace atomic absorption spectrophotometry）檢測研究對象作業(yè)環(huán)境中鉻及其化合物濃度及血清鉻含量；全血提取DNA，采用甲基化特異性PCR法(Methylation-Specific PCR,MSP)擴增P16基因并測定其甲基化狀態(tài)；采用酶聯(lián)免疫吸附法（Enzyme-Link

4、ed Immuno Sorbent Assay,ELISA）檢測血清8-羥基脫氧鳥苷（8-hydroxydeoxyguanosine,8-OHdG）、丙二醛（Malondialdehyde,MDA）、谷胱甘肽（Glutathione,GSH）和P16蛋白的含量。對分類變量進行?2檢驗，對連續(xù)性變量采用t檢驗及方差分析，分析工種、班次、工齡、吸煙及飲酒等對職業(yè)性鉻暴露工人的外周血P16基因甲基化的影響，采用非條件logistic回歸進一步

5、分析外周血P16基因甲基化的影響因素。
　　結果:
　　1.研究對象鉻的內(nèi)外暴露檢測結果
　　暴露組煉鋼車間、連鑄車間、澆鋼車間與對照組鍋爐運行車間鉻及其化合物暴露濃度作t檢驗，結果暴露組各個車間鉻及其化合物濃度均高于對照組，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。暴露組血鉻濃度高于對照組，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.001）。暴露組人群具體按工種分為煉鋼工組、連鑄工組及澆鋼工組，加之對照組鍋爐車間組；進行組間的血清鉻含量

6、方差分析發(fā)現(xiàn)，四組間血鉻含量差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.001）。進一步采用LSD-t檢驗對四組人群做兩兩比較，差異均具有統(tǒng)計學意義（P<0.001）。
　　2.研究對象外周血P16基因甲基化率及P16蛋白表達含量的比較
　　經(jīng)?2檢驗暴露組外周血P16基因甲基化率明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.001）；經(jīng)wilcoxon秩和檢驗暴露組血清P16蛋白表達含量低于對照組，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.024）；t檢驗

7、分析氧化應激指標顯示：暴露組血清8-OHdG含量高于對照組，差異具有統(tǒng)計學意義（P=0.012）；暴露組血清GSH含量低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P=0.028）；暴露組與對照組間血清MDA含量差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。Spearman秩相關分析結果外周血P16基因甲基化與血清8-OHdG、MDA和GSH含量間并無顯著相關性（P=0.492、0.710和0.085）。
　　3.職業(yè)性鉻暴露人群外周血P16基因甲基化影響因

8、素分析因素LSD-t檢驗煉鋼工連鑄工和澆鋼工間外周血P16基因甲基化率，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.001）；倒班組的外周血P16基因甲基化率明顯高于長白班組，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.001）。暴露人群按工齡分組，30~38年工齡段工人外周血P16基因甲基化率最高（80.5％），隨工齡的增加外周血P16基因甲基化率呈升高趨勢，各工齡段差異具有統(tǒng)計學意義（趨勢?2=9.018，P=0.029）；暴露人群吸煙組與非吸煙組外周血P16基因甲

9、基化率差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）；暴露人群飲酒組與非飲酒組外周血P16基因甲基化率差異亦無統(tǒng)計學意義（P>0.05）；非條件logistic回歸分析顯示：高血鉻濃度（OR=1.956，95%CI：1.285~2.977）與倒班（OR=2.408，1.795~5.828）為職業(yè)性鉻暴露工人外周血P16基因甲基化的危險因素。
　　結論：
　　1.不銹鋼冶煉車間空氣鉻及其化合物濃度明顯高于鍋爐運行車間，但未超過國家職業(yè)衛(wèi)生標