PEA3對FAAP基因的調控.pdf

1、Ets家族能編碼一大類轉錄因子。編碼的所有轉錄因子都有一個高度保守的含85個氨基酸的DNA結合結構域，被命名為ETS結構域。它能特異性的識別并結合嘌呤豐富的DNA中心靶序列5ˊ-GGA(A/T)-3ˊ。根據(jù)轉錄因子的轉錄激活結構域和ETS結構域將所有的Ets家族成員分成了四大類，每類包含幾個亞家族，每個亞家族又包含不同的成員。PEA3亞家族就屬于Ets家族，它包含三個家族成員：ER81/ETV1、PEA3/ETV4、ERM/ETV5。P

2、EA3亞家族的三個成員ETV1、ETV4、ETV5在Ets結構域的同源性高達95％，在轉錄激活域的同源性高達85％。
　　粘著斑相關蛋白（FAAP，focal adhesion associated protein）是由小鼠D10Wsu52e基因編碼的。此蛋白約55KD，含505個氨基酸。FAAP存在于許多物種中且高度保守。在細菌和人中已鑒定出它的同源物分別為 RtcB和HSPC117。已有研究證明，RtcB是一種獨特的依賴GTP

3、的RNA連接酶和DNA連接酶。而HSPC117是人類tRNA連接酶復合體的必需亞單位。
　　通過生物信息學分析發(fā)現(xiàn)FAAP啟動子上含有8個PEA3結合位點?？寺×薖EA3家族的三個成員ER81/ETV1、PEA3/ETV4、ERM/ETV5，以及3個熒光素酶報告基因 pGL2-492，pGL2-336，pGL2-276。pGL2-492含有全部的8個結合位點，pGL2-336含有4個結合位點，pGL2-276只含有1個結合位點。同

4、時將PEA3結合位點的核心序列 AGGA突變成 ATTT,克隆突變體 pGL2-m492、pGL2-m336、pGL2-m276。通過雙熒光素酶實驗發(fā)現(xiàn)ETV1、ETV4、ETV5都對pGL2-1317具有活性影響，且ETV4對pGL2-492、pGL2-336和pGL2-276也具有活性影響。最后，通過凝膠阻滯實驗也證實了PEA3與小鼠FAAP啟動子具有一定的結合作用。
　　總之，我們的研究表明PEA3能通過結合FAAP啟動子結