兒茶素對6-OHDA誘導的PC12細胞凋亡及線粒體PT孔開放的影響.pdf

1、浙江大學碩士學位論文兒茶素對6OHDA誘導的PC12細胞凋亡及線粒體PT孔開放的影響姓名：金超芳申請學位級別：碩士專業(yè)：茶學指導教師：沈生榮2001.5.1中文摘要以神經(jīng)毒素6OHDA誘導PCI2細胞凋亡長期被用作PD研究模型。由于氧應(yīng)激在PD發(fā)病中起重要作用，本研究旨在探討天然抗氧化劑茶多酚(GTPs)及其主要的兒茶素單體成分如EGCG，ECG，EGC，EC和()C等是否有神經(jīng)保護作用，從而探討它們是否有作為PD新藥研究及應(yīng)用的前景。

2、本研究利用細胞生物、生化等技術(shù)研究茶多酚及其單體對6OHDA誘導的多巴胺能細胞株P(guān)CI2細胞凋亡的作用，并比較不同單體的作用效果，根據(jù)單體的分子結(jié)構(gòu)及生化特性來探討其作用機理。f細胞存活率實驗表明6OHDA可時間劑量依賴性地損傷PCI2細胞；倒置相I差豆鋇鏡觀察表明，PCI2細胞受損后，細胞變圓，貼壁狀態(tài)變差：熒光顯微鏡觀察細胞核染色體變化顯示，正常細胞核質(zhì)均一呈淺藍色，而出現(xiàn)凋亡時，細胞核固縮，染色質(zhì)凝聚，DNA聚集成亮點。有些可觀察

3、到凋亡小體；DNA電泳出現(xiàn)典型的DNA梯狀條帶。在6OHDA處理前提前30min／JⅡ入不同劑量的保護劑，對6OHDA造成的上述細胞損傷有不同的作用。流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡率結(jié)果表明GTPs，EGCG和ECG表現(xiàn)出劑量依賴的保護作用，且在0204mM時保護作用最好：EC和()C保護作用不明顯；EGC則表現(xiàn)了劑量依賴的輕微損傷作用。熒光及DNA電泳的結(jié)果也表明GTPs，EGCG和ECG保護效果最好。兒茶素對PCI2細胞的保護作用依次為：E

4、CG溯GG珊sI’C()CEGC。對線粒體膨脹及線粒體膜電位的研究發(fā)現(xiàn)，兒茶素對線粒體損傷有不同的調(diào)節(jié)作用，表現(xiàn)為：ECG，EGCG和OTPs對Ca2和H202導致的線粒體通透性改變有抑制其膨脹的作用：而EC，(斗C和EGC卻有促進作用。OTPs對ca2誘導的線粒體Ca2釋放隨加入時間不同，表現(xiàn)有抑制和加速釋放的雙重作用：與ca2同時加入，它們可抑制線粒體對Ca2的吸收和線粒體Ca2的釋放；在線粒體吸收ca2達到最大時加入GTPs，則它